主要配置:微滴式数字PCR系统主机、分析软件、专用电脑工作站、配套原厂试剂耗材、单细胞级核酸微滴制备器。
技术参数:
①光源:至少2个不同波长LED冷光源;检测器:至少2个光电检测器;
②样品扩增:通量96个,具有温度梯度功能,同时筛选6个以上不同退火温度,加快检测体系的优化和建立;检测通道:至少两个荧光检测通道,无需加入参比荧光染料识别微滴
③可实现双荧光同时检测:FAM/HEX(VIC),兼容EvaGreen;,一个反应最多可同时检测4个靶标,荧光标记方式兼容荧光染料和荧光探针
④可直接检测DNA/cDNA/RNA样品,需提供不少于3篇支持直接检测RNA样品的文献(提供文献索引信息及证明以上事项的文献截图证明)。
⑤质控方式:具有后台实时微滴质控机制,自动记录并剔除质量不合格的微滴,保证检测结果的可靠性。
⑥系统工作效率:192个样本的检测全流程耗时≤8小时;96个样本的检测全流程耗时≤5小时;16个样本的检测全流程耗时≤2.5小时。反应体系:≥20µl,支持回收产物功能,并用于下游分析和其它应用(如NGS文库制备等)。灵敏度:能检测到单拷贝基因;
⑦动态范围:5个数量级,1-100,000,需提供不少于3篇支持该动态范围数量级的文献(提供文献索引信息及证明以上事项的文献截图证明),精确度为10%,单一样本最大检测微滴总数150万;
⑧辅助设备:无需外接气体罐或空气压缩机,方便实验室布置和维护管理。
⑨软件功能1:软件能显示每个微滴FAM(或EvaGreen)通道和HEX(VIC)通道的荧光信号,计算给出每个样品中含有靶分子的起始拷贝数或浓度、拷贝数变异CNV、稀有突变百分比分度和连锁分析功能,且结果可直接打印输出或导入Excel表格。
软件功能2:可对多个样品(技术重复)的平均值和总误差进行统计分析,可合并多个样品(技术重复)的微滴总数进行统计分析,可以给出泊松误差并显示随机误差。
软件功能3:阈值线可自动或手动设置,每个样本可单独设定阈值线;具有一维图、二维图、直方图。
软件功能4:自动识别复杂微滴分簇,支持多至4重自动分析以及drop-off检测功能。